enr from estrutural e bioquímica caracterização de enzimas envolvidas na biossíntese de ácido clorogênico caracteriza estrutural e bioquímica de enzimas envolvidas na biossíntese de ácidos clorogênicos

Resumo: Os ácidos clorogênicos (CGAs) representam uma família de ésteres formados por um derivado de ácido cinâmico combinado com ácido quínico ou ácido shikimic. Estes metabólitos secundários produzidos por fenilpropanóides são generalizados em plantas terrestres e são uma importante fonte de antioxidantes alimentares. Ésteres hidroxicinâmica-coa são os precursores de CGCs e outros compostos fenólicos, como ligninas. Estes intermediários ativados são sintetizados a partir de um ácido hidroxicinâmico e coenzima A por 4-Coumarate CoA Ligase (4Cl) pertencentes à superfamília de enzimas de adenilatos. A Nicotiana Tabacum 4Cl2 foi utilizada para a produção de ésteres e sua estrutura foi resolvida por substituição molecular. Dois genes codificando para hidroxicinâmica-CoA shikimate / quinate hidroxicinnainnamiltransferases no Coffea Canaphora foram clonados. A CCHCT e CCHQT, que pertencem à superfamília de acil-co-dependente aciltransferases, foram superexpressas em E. coli e purificadas à homogeneidade. A análise de difração de raios X do CCHCT tornou possível determinar sua estrutura por substituição molecular. Um modelo foi derivado por homologia de sequência para o CCHQT para fornecer determinantes de preferência por ácido quínico ou ácido shikimic. A modelagem molecular foi realizada para identificar os resíduos potencialmente envolvidos em interações de substrato enzimático. A análise de cromatografia líquida de alto desempenho das reações enzimáticas mostraram que essas enzimas são capazes de sintetizar o ácido 5-O-cafealquínico, mas também o diestense de 3,5-o-diodoylinic, que é um grande composto de grãos de café. Amadurecimento. A produção de variantes dirigiu a mutagênese permitiu a identificação de grandes resíduos para a catálise de reações de mono e diacilação. A abordagem combinada da biologia estrutural e da enzimologia é particularmente útil para melhor entender o papel do HCT e HQT.

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