RO FR structurală și biochimică caracterizarea enzimelor implicate în biosinteza acidului clorogenic Caracterizarea structurală și biochimică a enzimelor implicate în biosinteza acizilor clorogeni

Rezumat: Acizii clorogeni (CGA) reprezintă o familie de esteri formați dintr-un derivat de acid cinamic combinat cu acid chinic sau acid shikimic. Acești metaboliți secundari produși de fenilpropanoide sunt răspândiți în plantele terestre și sunt o sursă majoră de antioxidanți alimentari. Hidroxicinnamoy-CoA esterii sunt precursorii CGC și alți compuși fenolici, cum ar fi ligninele. Acești intermediari activi sunt sintetizați dintr-un acid hidroxicinamic și coenzima A, prin ligază COA 4-CoAmerat (4CL) aparținând superfamiliei enzimelor adenilatelor. Nicotiana Tabacum 4Cl2 a fost utilizată pentru producerea de esteri, iar structura sa a fost rezolvată prin înlocuirea moleculară. Două gene care codifică pentru hidroxicinamoy-CoA Shikimimittransferazele de la Coffea Canefora au fost clonate. CCHCT și CCHQT, care aparțin superfamiliei aciltransferazelor acil-co-dependente, au fost supraexprimate în E. coli și purificate la omogenitate. Analiza de difracție cu raze X CCHCT a făcut posibilă determinarea structurii sale prin înlocuirea moleculară. Un model a fost derivat prin omologia secvenței pentru CCHQT pentru a oferi determinanților de preferință pentru acidul quinic sau acidul shikimic. Modelarea moleculară a fost efectuată pentru a identifica reziduurile potențial implicate în interacțiunile de substraturi enzimatice. Analiza de cromatografie lichidă de înaltă performanță a reacțiilor enzimatice au arătat că aceste enzime sunt capabile să sintetizeze acidul 5-O-cafefeilic, dar și diesterul 3,5-O-Dicedoylinic, care este un compus major de cereale de cafea. Ripening. Producția de variante prin mutageneză direcționată a permis identificarea reziduurilor mari pentru cataliza reacțiilor mono- și diacică. Abordarea combinată a biologiei și enzimologiei structurale este deosebit de utilă pentru o mai bună înțelegere a rolului HCT și HQT.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *